当前位置: 首页 > >

三疣梭子蟹病原菌检测与分析_论文

发布时间:

河北科技师范学院学报 第2 4卷第 4期 ,00年 1   21 2月 Ju lo  b iN r lUnv ri  fS in e& T c n lg   12   o 4 De  0 0 o ma  fHe e  oma  ies yo ce c t e h oo yVo.4 N .   c2 1   三 疣 梭 子 蟹 病 原 茵检 测 与 分 析  毕可然 , 立 国, 梁 阎斌伦 , 高  焕 , 秦  蕾 , 晓 君  张 ( 海工 学院海洋学 院江苏省海洋生物技术重点实验室 , 淮 江苏 连云港 ,2 0 5  2 20 ) 摘要 :分离患病三疣梭子蟹样本 中的病原 菌 , 对分离菌株进 行形态特 征 、 化特 性和分 子生 物学鉴定 。采用  理 普通营养琼脂及 zbl 2 6 oe1 1 E海水营养琼脂分离患病样本 中的病原菌 。采用细 菌常规 生化鉴 定方法 , 2 了解 细  菌的形态和生理生化特 性。采用 1S rN 6  R A和 gr yB基 因序列 同源性 比对 , 一步 明确该 病原 菌 的分类 学地  进 位 。采用人工感染实验 的方 法 , 明分离菌株是三疣梭子蟹致病病原菌 。该菌革 兰氏阴性 , 证 氧化酶 阳性 , 萄  葡 糖发酵型 , 在低 于 1 / OgL的 N C 胨水 中不生长 。1 Sr N aI 6   A和 gr 因与需钠弧 菌 ( 6 0n tee ) R yB基      ar gn 同源序  i 列具有 9 %的相似性 。分离 菌株 对三疣梭子蟹有明显的致病 性。需钠 弧菌是引起 江苏省连 云港市赣榆县石  9 桥镇九里村三疣梭子蟹严重 死亡的病原菌 。   关键词 : 三疣梭子蟹 ; 需钠弧菌 ;6   N 1 Sr A基 因;yB基 因  R gr 中图分类号 :9 5 ¥4   文献标 志码 :   A 文章编号 :6 27 8 ( 00 0  0 3  17 -9 3 2 1 ) 4 2 J 三疣梭 子蟹 ( o u u ttbruau) P  ̄ ns rueclts 隶属 甲壳 纲 Cut e , 足 目 D cpd ,  i rs ca 十 a eaoa 梭子 蟹科 Pr nde  ot ia , u 梭子蟹属 P  ̄ ns广泛分布于我国北起辽东半岛、 o u u, 山东半岛, 南到广东 、 广西各海区以及 日 朝鲜、 本、 马  来西亚群岛等水域 , 是一种大型海产经济蟹类L 。因其 肉质鲜美 , l   J 营养 丰富, 是人们极为喜爱 的水产  品, 同时也是出口刨汇的重要水产品之一。*年来, 随着梭子蟹人工繁育 、 中间暂养和养成技术的突破 ,   养殖发展迅猛, 已成为继 中国对虾 以后我国海水甲壳类养殖的主导品种之一 。但随着养殖规模的不断  扩大及养 殖 集约 化程 度 的不 断提 高 , 种病 害 的发生也 越来 越频 繁 , 各 成为 制 约三疣 梭子 蟹养殖 业进一 步  发展 的重 要 因素 。 目前所 发 现 的三疣 梭子蟹 疾病 主要是 由假 丝酵 母 菌属 酵母 菌 ( add lp i ) 、 C niao ohl  】  e a 美 人鱼发 光杆 菌 ( ir a sl) 、 Vbi dm e  j恶臭 假单胞 菌 ( suo oa uia ]溶 藻 弧菌 ( ir o a Pedm ns t ) 、 p d Vbi  D位   o啦 易 ) 及葡萄牙假丝酵母 ( ad al in @ 等感染引起 的细菌性疾病。 C ni   sai   d ut a   21 年 7 , 00 月 江苏省连云港市赣榆县石桥镇九里村放养 1 个月左右 的三 疣梭子蟹发生严重疾病 。   病蟹体长 2—  m, 3c 伴有 甲壳挂脏 , 不蜕皮 , 仅在池塘边游动等症状。笔者报告对发病三疣梭子蟹病原  细菌的检验结果 , 以期为预防和治疗该病提供理论依据和参考 。   1 材 料 与 方 法  1 1 细菌 分离及 纯 培养  . 取垂死病蟹 5只, 以无菌生理盐水冲洗干净后 , 用体积分数为 07 .5的酒精棉球将外壳反复擦拭进  行体表消毒, 再以灭菌解剖刀及镊子将蟹壳剥开, 无菌操作取液化肌 肉和心脏组织 , 划线接种于普通 营  养琼脂 及 zbl 26 oe1 1E海 水 营养琼 脂* 板 ; 2 同时 , 取肌 肉和 心脏 组 织 抹 片 后 革兰 氏染 色镜 检 细 菌 。接 种  后 *板 置 2 8℃培 养 2  , * 板上 挑取 优势菌 落进 行纯 培养 , 4h从 转接 斜 面保存 供 检验 用 。   1 2 致 病性 试验  . 人工 感染 用 三疣 梭子 蟹 为 Ⅲ期 幼 蟹 , 自赣 榆 县 一 家养 蟹 场 , 取 实验 室 暂 养 2周 后 使 用 。选取 菌 株  X1 A 接种于普通营养肉汤 , 2 8℃过夜培养后作为供试菌液 , 菌悬液含量为 5 1   加C U L 试验设 3 . x1 - 0 F/ ,   个*行组 , 每组 6只幼蟹 , 均为浸浴感染 ; 对照组接种 同剂量无菌营养 肉汤, 均隔离养殖于试验水族箱  中, 每天 观察试 验 梭子 蟹感 染后 的发病 与死亡 情况 。   基金项 目: 苏省水产三项工程项 目( E编号 : 0O5 ) 江苏 省 自然科学 基金项 目( 目编号 : K 0 96 ) 淮海工  江 项 l P 1_8 ; 项 B 2 0 13 ; 学 院江苏省海洋生物技术重点建设实验 室基金 ( 目编号 :08 0 6 。 项 2 0 HS 1 )   通讯作者 , , 女 博士 , 教授 。主要研究方 向 : 水产动物病害及 病原微生 物学 。Em i: j3 7 13 cr。 . alz 90 @ 6   o   x 2n   收 稿 日期 :0 01 -1 2 1 —2   0 2  4 河北科技师范学院学报 



友情链接: 时尚网 总结汇报 幼儿教育 小学教育 初中学习资料网